1.1 中文名称 饲猜中首要病原微生物快速检测办法-微生物快速检测体系
1.2 英文名称 Rapid detection method of main pathogenic microorganisms in feed-Micro Biology Survey (MBS) 2.规模 本规范规则了饲猜中细菌总数、沙门氏菌、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、 单核增生李斯特菌微生物快速检测体系(MBS)检测办法。
本规范适用于合作饲料(蛋鸡合作饲料、肉鸡合作饲料、猪合作饲料、肉鸭合作饲料)、 动物源性饲料(血粉、肉骨粉、鱼粉、茸毛粉、乳清粉)、植物源性饲料(玉米、麸皮、豆 粕、花生粕、棉籽粕)中细菌总数、沙门氏菌、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、 单核增生李斯特菌含量的快速检测。 3.规范性引证文件 下列文件中的内容经过文中的规范性引证而构成本文件必不可少的条款。其间,注日期 的引证文件,仅该日期对应的版别适用于本文件;不注日期的引证文件,其最新版别(包含 一切的修正单)适用于本文件。
GB 19489 实验室 生物安全通用要求 4 原理 MBS 办法经过氧化复原指示剂丈量微生物首要代谢途径中氧化复原酶的催化活动。氧 化复原指示剂会依据介质的氧化状况改动指示剂色彩。色彩改动耗时与微生物污染程度的 Log 值呈负相关联系,然后可获得观察到的酶活性与查验测验样本中活细胞的数量之间有确实 定相关性。 微生物快速检测验剂瓶内的养分物,保持方针细菌的成长;挑选性药剂,按捺非方针细菌的 成长;而其间的复原剂,作为递氢体,能在细胞色素 C 后把电子转移到细菌呼吸链,而又不被氧分子氧化。假如方针细菌存在,那么检测瓶中的氧化复原反响色素会依据媒质的 氧化复原状况改动色彩。MBS 主机经过三光波勘探色彩改动,最终依据整合色彩改动 的时刻确认细菌的含量。
5.1 20%无菌甘油:水:甘油=5:1。 5.2 微生物快速检测验剂瓶。
6.1 微生物快速检测体系(MBS):MBS-MR 主机、笔记本电脑、MBS 中文操作软件和微 生物快速检测验剂瓶。 6.2 冰箱:2-5℃或-20℃。 6.3 涡旋振动器。 6.4 电子剖析天平:感量 0.01g。
7.1.1 将 MBS-MR 主机、笔记本电脑接通电源,并用数据线将两者衔接,在电脑上发动 MBS 中文操作软件,点击“参数”录入有关信息(包含:操作员名字、操作员职务、检测样 本所属客户等信息);在软件操作界面的样品设置选项中对样品进行根底信息设置,在剖析 设置选项中设置细菌总数,并挑选定量剖析。
7.1.2 将配套 20%无菌甘油加入到细菌总数试剂瓶中,溶解试剂。7.1.3 带好无菌手套,用消毒后的药匙或无菌镊子取待测饲料样品,并准确称取 1g(准确 到 0.01g),加入到细菌总数试剂瓶中。7.1.4 摇摆试剂瓶(手摇 1-2 分钟或涡旋振动器振动 20-30 秒),直到饲料样品溶解彻底或 与试剂充沛混合。 7.1.5 设置相应的参数后,将处理好的试剂瓶放入 MBS-MR 主机中,进行孵育,MBS-MR 主时机主动控温,然后开端做剖析。 7.1.6 剖析完成后,按下试剂瓶顶部,瓶盖内部的消毒灭菌物质会开释至试剂瓶内,5-10 分钟即可充沛灭菌,将灭菌后的试剂瓶丢掉到生物垃圾箱中会集处理。 7.1.7 检测完毕后,体系能输出查验陈述,陈述的内容有用户设定的悉数信息、检测结 果,如变色时刻、样本中微生物的浓度和检测中的一切参数。 7.2 饲猜中沙门氏菌的查验
7.2.1 在 7.1.1 中的剖析设置选项中设置沙门氏菌,并挑选定量剖析,其他过程同 7.1.1—7.1.7。7.3 饲猜中大肠菌群的查验
7.3.1 在 7.1.1 中的剖析设置选项中设置大肠菌群,并挑选定量剖析,其他过程同 7.1.1—7.1.7。
7.4.1 在 7.1.1 中的剖析设置选项中设置金黄色葡萄球菌,并挑选定量剖析,其他过程同
7.5.1 在 7.1.1 中的剖析设置选项中设置大肠埃希菌,并挑选定量剖析,其他过程同
7.6.1 在 7.1.1 中的剖析设置选项中设置单核增生李斯特菌,并挑选定量剖析,其他过程同
微生物快速检测体系(MBS)主动给出定量剖析检测陈述,读取数据,记载成果。